鈣離子熒光探針腔腸素

鈣測(cè)量對(duì)于許多生物學(xué)研究至關(guān)重要。水母發(fā)光蛋白復(fù)合物包含22kD的載水母發(fā)光蛋白，分子氧和發(fā)光體腔腸素。當(dāng)三個(gè)Ca2 +離子與該配合物結(jié)合時(shí)，腔腸素被氧化為腔腸酰胺，并伴有二氧化碳和藍(lán)光的釋放。水母發(fā)光蛋白的生物發(fā)光對(duì)Ca2 +濃度的大約三次方依賴性，可以在?0.1 μM至> 100 μM的寬檢測(cè)范圍內(nèi)測(cè)量Ca2 +濃度。與熒光Ca2 +指示劑不同，可以檢測(cè)Ca2 +結(jié)合的水母發(fā)光蛋白而無(wú)需照亮樣品，從而消除了自發(fā)熒光的干擾。天然腔腸素及其衍生物賦予水母發(fā)光蛋白復(fù)合物不同的Ca2 +親和力和光譜性質(zhì)。據(jù)報(bào)道，用腔腸素hcp重組的重組載脂蛋白水泡蛋白總體上具有最佳的發(fā)光，同時(shí)具有高量子產(chǎn)率和快速響應(yīng)時(shí)間。但是，腔腸素類似物在細(xì)胞內(nèi)重建水母發(fā)光蛋白可能相對(duì)較慢。含有腔腸素的cp，f或h形式的水母發(fā)光蛋白顯示的發(fā)光強(qiáng)度是用天然腔腸素重構(gòu)的脫輔基水母發(fā)光蛋白的發(fā)光強(qiáng)度的10-20倍。腔腸素h和cp已用于GPCR的HTS篩選測(cè)定中。