鈣離子熒光探針腔腸素 f

鈣測量對于許多生物學研究至關重要。水母發(fā)光蛋白復合物包含22kD的載水母發(fā)光蛋白，分子氧和發(fā)光體腔腸素。當三個Ca2 +離子與該配合物結合時，腔腸素被氧化為腔腸酰胺，并伴有二氧化碳和藍光的釋放。水母發(fā)光蛋白的生物發(fā)光對Ca2 +濃度的大約三次方依賴性，可以在?0.1 μM至> 100 μM的寬檢測范圍內測量Ca2 +濃度。與熒光Ca2 +指示劑不同，可以檢測Ca2 +結合的水母發(fā)光蛋白而無需照亮樣品，從而消除了自發(fā)熒光的干擾。天然腔腸素及其衍生物賦予水母發(fā)光蛋白復合物不同的Ca2 +親和力和光譜性質。據(jù)報道，用腔腸素hcp重組的重組載脂蛋白水泡蛋白總體上具有最佳的發(fā)光，同時具有高量子產(chǎn)率和快速響應時間。但是，腔腸素類似物在細胞內重建水母發(fā)光蛋白可能相對較慢。含有腔腸素的cp，f或h形式的水母發(fā)光蛋白顯示的發(fā)光強度是用天然腔腸素重構的脫輔基水母發(fā)光蛋白的發(fā)光強度的10-20倍。腔腸素h和cp已用于GPCR的HTS篩選測定中。